MPE-Anwendungen mit Coherent Chameleon Laser

Heute möchten wir Ihnen zwei interessante MPE-Anwendungen (Multi-Photon-Excitation) von Kunden aus Frankreich mit unseren Chameleon Lasern vorstellen. Wir würden uns über ein Feedback Ihrerseits sehr freuen. Sollten Sie Interesse an weiteren Veröffentlichungen von Kundenapplikationen haben, werden wir das gerne zukünftig in unseren Newslettern berücksichtigen. Die Beiträge sollen auch dem wachsenden internationalen Leserkreis unseres Newsletters Rechnung tragen.

Der Chameleon wurde von Coherent im Jahr 2003 vorgestellt, und entwickelte sich schnell zum Laser der Wahl für die Multi-Photonen-Mikroskopie. Er ist die unangefochtene Nummer 1 in Sachen Durchstimmbarkeit, Leistung, Durchstimmgeschwindigkeit, Wellenlängenerweiterung (OPO), Bedienerfreundlichkeit und Verlässlichkeit.

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Dr. Emmanuel Beaurepaire im LOB (Laboratory for Optics and Biosciences) ist ein anerkannter Pionier im Bereich neuer Imaging-Techniken, wie MPE oder der Generierung der zweiten und dritten Harmonischen, für die Erforschung der embryonalen Entwicklung am lebenden intakten Gewebe. Dr. Beaurepaire nutzt seinen Chameleon Ultra II um fluoreszierende Proteine wie GFP anzuregen, oder auch um Imaging ohne Marker durchzuführen (endogene Kontraste nutzen die natürliche Fluoreszenz oder die Generierung der zweiten/dritten Harmonischen). Der Laser wird ebenfalls für das Ablatieren, das OPO-Pumpen, und das Imaging durch die dritte Harmonische eingesetzt.

Dr. Beaurepaire weiß vor allem die höhere Leistung des Chameleon zu schätzen: "Es ist ausgesprochen hilfreich, um das Maximale aus dem OPO heraus zu holen. Es lässt sich damit sogar ein gleichzeitiger Betrieb mit dem Chameleon direkt und dem OPO – sowohl für das Imaging als auch für die Ablation – realisieren". Er berichtet, dass Biophysiker wie er, welche vormals die alte Generation der Ti:S-Oszillatoren in Gebrauch hatten, jetzt die vollautomatischen Laser sehr zu würdigen wissen, denn "jetzt können wir uns wirklich ausschließlich auf das Experiment konzentrieren, und nicht auf den Laser, zumal wir noch einige Forschungszeit für unser eigen entwickeltes Mikroskop aufwenden müssen". Beeindruckt ist er auch von der Langzeitstabilität des Lasers und seiner kompakten Grösse.

Multimodal multiphoton imaging of intact tissue. Left: Rat lung tissue. Green: SHG (collagen fibers); Red: endogenous 2PEF; Pink: THG. Right: Drosophila embryo. Green: GFP 2PEF (nuclei); blue: endogenous 2PEF; Yellow: THG. Scale bars: 50 μm.
References: www.lob.polytechnique.fr. Optics Letters 29, 2881 (2004) and Nature Methods 3, 47 (2006).

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Ein weiterer begeisterter Chameleon-Nutzer ist die "Mosaic"-Gruppe am Fresnel-Institut, geführt von Dr. Herve Rigneault, welche neue optische Imaging-Techniken für Zell- und Gewebedarstellung untersucht und entwickelt. Dr. Patrick Ferrand, Hauptansprechpartner in diesem Forschungsbereich, setzt den Chameleon Ultra II im Zweiphotonen-Imaging und in der Fluoreszenz-Korrelationsspektroskopie an einem speziell angefertigten Konfokal-Mikroskop ein, welches über zwei völlig von einander unabhängige Messpunkte (foci) verfügt. Solch ein System erlaubt simultane, multimodale Messungen an zwei räumlich verschiedenen Punkten auf derselben Probe. Eine andere Möglichkeit besteht darin, MPE und SHG zu kombinieren. Am Chameleon erfreut Dr. Ferrand vor allem seine Fähigkeit der schnellen Wellenlängen-Einstellung, seine volle Automatisierung, und die Verlässlichkeit des Lasersystems.

Ein weiterer Einsatzbereich des Lasers liegt in der CARS-Mikroskopie für ein Multikontrast-Imaging an derselben Probe.

Multiphoton imaging. Left: TPEF (auto-fluorescence) of a cut of lily ovary. Right: TPEF (auto-fluorescence) and SHG of a fresh mouse node without additional fluorescent marker.

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Weitere Auskünfte erteilen wir Ihnen gerne unter der Rufnummer 06071-968-204.

Wir wünschen allen Lesern frohe Festtage und einen glücklichen Start ins neue Jahr !

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Zu Coherent, Inc.

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